目前，每年至少有50%的抗生素是用于畜牧业和水产养殖业。四环素类药物是临床使用zui多，zui广泛的一类抗生素，由于具有水溶性好，体内代谢后大部分以原形排出以及在环境中不易发生生物降解等特点，从而成为容易在水环境中储存和积蓄的一类抗生素。这些抗生素作为环境外源性化学物对环境生物及生态产生深远的影响，并zui终可能对人类的健康和生存造成不利的影响。同时，由于该类药物抗菌谱较广，可以预测其所产生的生态毒理效应是巨大的。因而，对四环素药物类的检测尤为必要。

       使用伍丰EX1700超快速液相色谱系统对市面销售的鸡肉中残留的四环素进行检测，效果良好：对土霉素、四环素、金霉素的加样回收率在80%以上。

一、实验条件

1.实验试剂

标准品四环素、土霉素、金霉素均购自德国EhrenstorferQuality公司；甲醇、乙腈（色谱纯）购自德国Meker公司；一水柠檬酸（AR）、二水柠檬酸三钠（AR）、三（CL）乙酸（AR）和二水合草酸（AR）均购自上海润捷化学试剂有限公司；自制超纯水。

2.  实验条件

仪器：伍丰EX1700超快速液相色谱系统

色谱柱:UHPLC XB-C18 (1.8μm ，50 mm×4.6 mm i.d.)

柱温：25℃

进样量：25 μl

流速：1.0 ml/min

流动相：乙腈：甲醇：0.03 M草酸=17：8：75

检测波长：350 nm

3. 实验样品的前处理

3.1   样品提取

用电子天平准确称取绞好的鸡肉5 g，分别加入体积分数20%的三CL乙酸溶液2 mL，pH=4的柠檬酸缓冲液20 mL，加入5 ug/mL混合标样100uL，机械混合10min，4 ℃、8000 r/min离心20 min，取上清液。

3.2样品萃取

Strata C-18E (500mg,3ml)（购自美国Phenomenex公司），先加5 mL甲醇活化，后加5 mL超纯水平衡，再取20 mL上清液上样，接着用10 mL 5%甲醇溶液淋洗，zui后用10mL 0.01mol/L的草酸-甲醇溶液洗脱并收集，60 ℃氮气吹干为止，1mL甲醇溶解，过0.45 μm滤膜，滤液供测定用。

二、实验结果

1 鸡肉中四环素类药物检测（添加水平0.1mg/kg）液相色谱图

添加水平：0.1mg/kg

1—土霉素；2—四环素；3—金霉素

2   鸡肉中四环素类药物检测（空白）液相色谱图

鸡肉空白

3 添加回收结果

三、 结论

    按照上述方法对鸡肉中的土霉素、四环素及金霉素在伍丰EX1700上的超快速液相色谱分析检测，加样回收率在80%-90%之间，可以满足鸡肉中上述四环素的含量分析。