高效液相色谱是目前应用较多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳;进样系统要求进样便利切换严密;由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。

    和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。HPLC日常操作注意事项：

1、选择流动相时应注意的几个问题：

• 尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。

• 避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。

• 试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。

• 流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有较强的紫外吸收，一般检测波长应大于流动相的截止波长。

 

 

2、泵的维护保养：

•  防止任何固体微粒进入泵体，否则会磨损柱塞、密封环缸体和单向阀，因此应预先对流动相进行过滤，可采用Millipore滤膜(0．22μm或 0．45μm )等过滤。泵的入口都应该连接砂滤棒(或片)， 输液泵的滤器应经常更换。

• 流动相不应含有任何腐蚀性物质， 含有缓冲液的流动相不应保留在泵内， 尤其是停泵过夜或更长时间。分析工作结束后必须用纯水充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合固定相，可以是甲醇或甲醇和水)

• 泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、密封环或缸体，终产生漏液。

• 输液泵的工作压力不要超过规定的高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏液。

 

3、紫外检测器维护保养：

• 流通池进入气泡会干扰基线，并极难排出，应使用充分脱气的流动相，以减少气泡的产生。

• 应定期冲洗系统，避免流通池干涸。

• 检测器中氘灯( 光源) 随着使用时间的增加，氘灯强度降低，噪音会不断增大，故分析前柱平衡得差不多时，再打开检测器，分析工作结束及时关闭检测器（频繁开关检测器也会缩短检测器寿命，一般开启间隔少于4小时，不建议关闭检测器）。 

• 尘埃在静电的作用下容易覆盖在光学元件上， 使光传播效率降低，增加了光散射， 影响分析效果， 因此检测器周围的环境应保持清洁。